产品货号:
CZ003
中文名称:
磁珠法游离DNA提取试剂盒
英文名称:
Circulating DNA Kit
产品规格:
20次|100次|10次(L)|50次(L)
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
产品简介:
本产品采用超顺磁性微球和预制缓冲液,以快速高效的方法从0.2~5mL血清或血浆等无细胞体液中提取游离DNA。提取的产物质量稳定可靠,可用于PCR扩增、测序和检测等后续实验。
操作流程:
准备物品(以1mL反应体系为例):
● 1.5mL离心管、15mL离心管:1个/样品
● 单通道移液器:200μL、1000μL
● 漩涡振荡器
● 恒温金属浴(或水浴锅):55℃
● 磁性分离器:可选用百奥莱博磁性分离器
● 异丙醇(AR):0.5mL/样品
● 75%(v/v)乙醇:3.8mL/样品
首次使用前:
● 在Proteinase K干粉中加入指定量(见管身标签)的Solution A,混匀后保存于2~8℃,或分装后保存于-20℃。
● 75%(v/v)乙醇:用户自备。
操作步骤:
以1mL样本量为例(若样本量≤5mL,其反应管规格、缓冲液加入量请参考表1;若样本量>5mL,请咨询技术支持)
1.裂解:取一个新的15mL离心管,加入100μL Proteinase K,再依次加入1mL血浆或血清样本和800μL Lysis Buffer,最大转速漩涡振荡混合均匀后,将离心管置于55℃加热10min(每隔5min漩涡震荡10 s)。
2.结合:向上述离心管中加入0.5mL异丙醇,漩涡震荡30 s后,再加入100μL Magnetic beads,最大转速漩涡震荡混匀后静置10min,然后将离心管置于磁性分离器上至溶液澄清,用移液器吸去上清液,并取下离心管。
3.洗涤:
(1)加入3mL Washing Buffer,漩涡震荡1min,使磁珠充分重悬,将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清,用移液器移去上清液并取下离心管。
(2)加入3mL 75%(v/v)乙醇(用户自备),漩涡震荡1min,使磁珠充分重悬,将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清,用移液器移去上清液并取下离心管。
(3)加入800μL 75%(v/v)乙醇(用户自备),转移上清液至新的1.5mL离心管中,漩涡震荡1min,使磁珠充分重悬,并于室温下静置1min,然后将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清,用移液器移去管盖及管底溶液。
注:步骤(3)可用小量程的移液器尽量除尽洗涤液。
4.干燥:保持离心管于磁性分离器上,于室温下静置10min后,取下离心管。
注:干燥过程中若发现反应管中有液体残留时,可用小量程移液器吸弃液体。
5.洗脱:加入50μL 55℃预热Elution Buffer,漩涡震荡1min或用移液器缓慢吹打磁珠50次,使磁珠充分重悬,于55℃加热5min后,将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清,转移上清液至新的1.5mL离心管中,此即为纯化得到的游离DNA,可保存于-20℃。
注:本产品的洗脱体积可低至20μL,但需注意洗脱效率与洗脱液体积有关,洗脱液体积越大,洗脱的核酸总量越多,但浓度越低。
注意事项:
1.操作之前,请务必认真阅读本产品手册。
2.提取效果与样本质量有关,应避免对样本进行反复冻融。
3.应避免对磁珠进行冷冻、离心等操作。
4.磁珠取用前应充分重悬均匀。
5.磁珠干燥前,应用移液器吸尽洗涤液。
6.应避免磁珠过度干燥,否则会严重降低核酸洗脱效率。
7.建议使用质量较好的离心管和移液器吸头,避免因粘附磁珠而造成损失。
相关搜索:磁珠法游离DNA提取试剂盒,Circulating DNA Kit
本产品采用超顺磁性微球和预制缓冲液,以快速高效的方法从0.2~5mL血清或血浆等无细胞体液中提取游离DNA。提取的产物质量稳定可靠,可用于PCR扩增、测序和检测等后续实验。
操作流程:
准备物品(以1mL反应体系为例):
● 1.5mL离心管、15mL离心管:1个/样品
● 单通道移液器:200μL、1000μL
● 漩涡振荡器
● 恒温金属浴(或水浴锅):55℃
● 磁性分离器:可选用百奥莱博磁性分离器
● 异丙醇(AR):0.5mL/样品
● 75%(v/v)乙醇:3.8mL/样品
首次使用前:
● 在Proteinase K干粉中加入指定量(见管身标签)的Solution A,混匀后保存于2~8℃,或分装后保存于-20℃。
● 75%(v/v)乙醇:用户自备。
操作步骤:
以1mL样本量为例(若样本量≤5mL,其反应管规格、缓冲液加入量请参考表1;若样本量>5mL,请咨询技术支持)
1.裂解:取一个新的15mL离心管,加入100μL Proteinase K,再依次加入1mL血浆或血清样本和800μL Lysis Buffer,最大转速漩涡振荡混合均匀后,将离心管置于55℃加热10min(每隔5min漩涡震荡10 s)。
2.结合:向上述离心管中加入0.5mL异丙醇,漩涡震荡30 s后,再加入100μL Magnetic beads,最大转速漩涡震荡混匀后静置10min,然后将离心管置于磁性分离器上至溶液澄清,用移液器吸去上清液,并取下离心管。
3.洗涤:
(1)加入3mL Washing Buffer,漩涡震荡1min,使磁珠充分重悬,将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清,用移液器移去上清液并取下离心管。
(2)加入3mL 75%(v/v)乙醇(用户自备),漩涡震荡1min,使磁珠充分重悬,将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清,用移液器移去上清液并取下离心管。
(3)加入800μL 75%(v/v)乙醇(用户自备),转移上清液至新的1.5mL离心管中,漩涡震荡1min,使磁珠充分重悬,并于室温下静置1min,然后将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清,用移液器移去管盖及管底溶液。
注:步骤(3)可用小量程的移液器尽量除尽洗涤液。
4.干燥:保持离心管于磁性分离器上,于室温下静置10min后,取下离心管。
注:干燥过程中若发现反应管中有液体残留时,可用小量程移液器吸弃液体。
5.洗脱:加入50μL 55℃预热Elution Buffer,漩涡震荡1min或用移液器缓慢吹打磁珠50次,使磁珠充分重悬,于55℃加热5min后,将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清,转移上清液至新的1.5mL离心管中,此即为纯化得到的游离DNA,可保存于-20℃。
注:本产品的洗脱体积可低至20μL,但需注意洗脱效率与洗脱液体积有关,洗脱液体积越大,洗脱的核酸总量越多,但浓度越低。
注意事项:
1.操作之前,请务必认真阅读本产品手册。
2.提取效果与样本质量有关,应避免对样本进行反复冻融。
3.应避免对磁珠进行冷冻、离心等操作。
4.磁珠取用前应充分重悬均匀。
5.磁珠干燥前,应用移液器吸尽洗涤液。
6.应避免磁珠过度干燥,否则会严重降低核酸洗脱效率。
7.建议使用质量较好的离心管和移液器吸头,避免因粘附磁珠而造成损失。
相关搜索:磁珠法游离DNA提取试剂盒,Circulating DNA Kit